湿热灭菌生物指示剂验证原理

根据灭菌工艺对微生物的强热致死效应：

 1.通常选用D值不低于1.5—3min的嗜热脂肪芽孢杆菌芽孢（每个指示剂的芽孢含量通常在10⁵—10⁷之间）作为生物指示剂对过热灭菌工艺进行验证。该类生物指示剂在F0值低于其存活时间（D值*芽孢的对数值-2）时，培养后的判读结果应当能全部呈阳性；当F0值高于其杀杀时间（D值*芽孢的对数值+4）时，培养后的所有生物指示剂均应呈阴性结果。

 2.对F0值为15min的灭菌工艺（药典推荐的常用灭菌工艺），可选用D值为1.5min、芽孢含量为10⁶个的微生物指示剂，或其他耐热性相当的微生物指示剂，对其灭菌效果进行验证。

  3.根据被灭菌物品的性质，来确定不同包装方式的灭菌生物指示剂生物指示剂。当灭菌溶液时，多选用自含式安瓿瓶生物指示剂；灭菌织物时，多选用芽孢条；灭菌管路时，则可能须选用特殊包装方式的生物指示剂（如用接有芽孢的钢丝、线等），以验证死角处（最冷点）的灭菌情况。

 4.选择时应该遵丛以下原则：

    首先，要掌握灭菌前产品中污染菌状况，包括污染菌的数量及其耐热性；

    其次，测定生物剂在待验证产品及验证用标准溶液中耐热性（D值和F值）；

    最后，根据产品的灭菌工艺条件、灭菌前产品中的污染菌控制要求及最终产品的无菌保证要求。

 5.用相关公式计算出验证时每个生物指示剂所需要的孢子数量。